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Taq PCR Mix 預(yù)混液即用型,操作方便快捷
本試劑盒中的2×PCR Master包含Taq DNA聚合酶、dNTP、MgCl2、PCR buffer、PCR反應(yīng)增強劑、穩(wěn)定劑和一種藍色示蹤染料。PCR反應(yīng)混合物的配制可在幾分鐘之內(nèi)完成,只需加引物、模板DNA和適量的去離子水。產(chǎn)品在PCR結(jié)束后可以直接電泳,無需再加入上樣緩沖液。 影響PCR反應(yīng)的因素很多,即使使用經(jīng)高度優(yōu)化的PCR Master也會遇到問題。如果發(fā)現(xiàn)PCR反應(yīng)沒有得到所需產(chǎn)物或條帶較弱,建議用試劑盒中提供的25 mmol/L MgCl2調(diào)節(jié)反應(yīng)體系中的Mg2+濃度,以期獲得更好的結(jié)果。
特點
即用型,操作方便快捷,節(jié)省時間。
已加入Loading Buffer,PCR結(jié)束后可以直接電泳。
操作步驟少,減少交叉污染。
擴增效率高。
2×PCR Master通常適用于擴增5 kb以下的片段。
應(yīng)用
常規(guī)PCR、高通量PCR檢測
PCR是利用DNA在體外攝氏95°高溫時變性會變成單鏈,低溫(經(jīng)常是60°C左右)時引物與單鏈按堿基互補配對的原則結(jié)合,再調(diào)溫度至DNA聚合酶適反應(yīng)溫度(72°C左右),DNA聚合酶沿著磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互補鏈。基于聚合酶制造的PCR儀實際就是一個溫控設(shè)備,能在變性溫度,復(fù)性溫度,延伸溫度之間很好地進行控制。