考馬斯亮藍(lán)快速染色液脫色方法

常規(guī)染色脫色方法：
 1、電泳結(jié)束后，將凝膠置于培養(yǎng)皿內(nèi)，加入染色液，確保覆蓋凝膠。
 2、置于水平搖床或側(cè)擺搖床上緩慢搖動(dòng)，室溫染色 1 小時(shí)或更長(zhǎng)時(shí)間。
 3、倒出染色液（可重復(fù)使用 2-3 次）。加入脫色液，確保覆蓋凝膠。
 4、置于搖床上緩慢搖動(dòng)，室溫脫色 4-24 小時(shí)。期間更換脫色液 2-4 次，至藍(lán)色背景全部脫去，蛋白條帶染色達(dá)到預(yù)期效果。一般脫色 1-2 小時(shí)后蛋白條帶即可出現(xiàn)。
 5、脫色后，凝膠保存在水中，用于拍照等。水中的凝膠會(huì)發(fā)生溶漲，如需避免溶漲，可以把膠保存在含 20%甘油的水中。保存可以制備干膠。
快速染色脫色方法： 
 1、電泳結(jié)束后，將凝膠置于適量考馬斯亮藍(lán)染色液中，微波爐加熱至接近沸騰或剛剛沸騰，立即停止加熱。膠濃度大于 10％的凝膠比較堅(jiān)韌，煮沸時(shí)不易破損；膠濃度小于 10%的凝膠，盡量避免煮沸。
 2、在染色液溫度較高的情況下，隨即在搖床上搖動(dòng) 5-10 分鐘。
 3、倒出染色液（可重復(fù)使用 2-3 次）。加入適量脫色液，確保覆蓋凝膠。
 4、微波爐加熱至接近沸騰或剛剛沸騰，立即停止加熱。
 5、在脫色液溫度較高的情況下，隨即在搖床上搖動(dòng) 5-10 分鐘。隨后通常能觀察到比較清楚的蛋白條帶。
 6、更換新鮮的脫色液，重復(fù)步驟 4 和步驟 5，直至藍(lán)色背景全部脫去，蛋白條帶達(dá)到預(yù)期染色效果。
 7、脫色后，凝膠保存在水中，用于拍照等?；蛑糜诤?20%甘油的水中。保存可以制備干膠。
注意事項(xiàng)：
 1、常規(guī)方法耗時(shí)較長(zhǎng)，但檢測(cè)靈敏度更高，染色效果更加穩(wěn)定?？焖俜椒ㄈ旧撋俣瓤?，通常檢測(cè)靈敏度略低，微波爐加熱時(shí)會(huì)出現(xiàn)溶液暴沸導(dǎo)致凝膠碎裂的情況，需特別小心。另外微波爐加熱加速染色液和脫色液中的乙酸揮發(fā)，好在通風(fēng)櫥中進(jìn)行。
 2、染色時(shí)間取決于凝膠厚度和染色時(shí)溫度。凝膠厚，溫度低，染色時(shí)間長(zhǎng)；凝膠薄，溫度高，染色時(shí)間短。凝膠和染色液的顏色一致，在染色液中看不清凝膠時(shí)，即為充分染色。染色時(shí)間延長(zhǎng)效果也更好。   
 3、脫色期間可以在脫色液中加入一片吸水紙，部分染料會(huì)吸附在吸水紙上，會(huì)加快脫色。脫色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致蛋白條帶的顏色變淺。
 4、操作時(shí)請(qǐng)穿戴實(shí)驗(yàn)服和一次性手套。